在雛雞的各種性別鑒定方法中，肛門鑒定法因準確、可靠，因而在生產中使用最為廣泛。
其原理為：在雛雞早期，公雛泄殖腔開口處可見生殖突起，長約2~4毫米，表面緊張，有彈性，手壓不易變形，有光澤，輪廓鮮明；母雛泄殖腔開口部一般無生殖突起，即使有殘留生殖突起者，多呈萎縮狀，柔軟，無彈性，無光澤，手壓易變形。
鑒定的最佳時間在出殼絨毛干后12小時，此時公、母雛生殖突起形態相差最為顯著，過早鑒定，雛雞身體綿軟，不易翻肛，且對雛雞的影響大；過晚翻肛，生殖突起發生變化，鑒定不易，且肛門發緊不易翻開，用力過大易對雛雞造成傷害。
操作者用左手的中指和無名指夾住雛雞頸部，用左手拇指輕壓腹部排糞，用右手拇指和食指放在泄殖腔兩側，輕輕翻開泄殖腔，如在泄殖腔口見有螺旋形突起，即為公雛，如是三角瓣形皺褶，即為母雛。