雞新城疫病毒抗膀胱癌作用的體內、體外實驗分析

摘要：目的是研究和分析雞新城疫病毒（NDV）抗膀胱癌作用的體內、體外實驗。 方法是采用小鼠膀胱腫瘤模型方法進行研究。 結果是體內實驗表明：對于膀胱癌細胞，BCG、MMC、NDV均具有一定殺傷作用，而 NDV 注射至瘤對側以及瘤內能抑制其生長，且注射至瘤內的效果顯著好于瘤對側。 體外實驗表明：對于膀胱癌細胞，BCG、MMC、NDV 均具有顯著殺傷作用。 結論：雞新城疫病毒對膀胱癌細胞的體內、 體外均具有良好的殺傷作用。
關鍵詞：雞新城疫病毒；抗膀胱癌作用；體內、體外實驗

近幾年，由于生物治療技術的逐漸興起和發展，雞新城疫病毒（NDV）逐漸獲得人們的重視[1]。 已有研究報道顯示，該病毒對惡性腫瘤，如惡性黑色素瘤、消化道腫瘤等，均具有治療效果，且不會導致人體出現較大的不良反應， 所以是抗腫瘤生物制劑中比較有前途的一種。 但目前在膀胱癌治療方面，對于該病毒的應用研究還相對較少[2]。 因此本文對雞新城疫病毒抗膀胱癌作用的體內、體外實驗進行了研究和分析，現具體報道如下：
1 一般資料與方法
1.1 一般資料
1.1.1 動物和細胞模型。 BST739（小鼠膀胱腫瘤模型）小鼠，體重 18～20 克，雌性，購自中國醫學科學院腫瘤醫院實驗動物中心。 由北京醫科大學泌尿外科研究所提供人膀胱癌 EL 細胞株。BST739 購自南京鐵道醫學院泌尿外科。
1.1.2 藥物。 雞新城疫病毒為凍干病毒疫苗，即 Losota，購自中國農業科學院獸藥監察所。 臨用前 BCG、MMC 配置濃度為 1毫克/毫升。
1.2 方法
1.2.1 體內實驗
將 BST739 瘤體均分為 0.1 厘米直徑的小塊，與小鼠胸腹皮下進行接種，2 天后將 20 只帶瘤小鼠隨機分為 4 組，分別在其瘤體內注射 MMC（1 毫克/毫升 ）、BCG（1 毫克/毫升 ）、NDV（100 毫克/毫升）、生理鹽水各 0.1 毫升，第 4 組則注射 NDV 至瘤體對側皮下；另設 1 組注射至腹壁皮下。 3 天后同時與其他小鼠進行腫瘤接種。 隔日對接種瘤體的短徑、長徑進行測量，并計算其體積。
1.2.2 體外試驗
在 96 孔培養板中加入 EJ 細胞， 細胞數量為 2×103/孔，含有 0.1 毫升培養液。 采用培養液將 NDV 配制成 1，10，100 毫克/毫升。 將 96 孔培養板中的細胞分為 4 組，當細胞貼壁 24 小時后將上清液吸出，并將上述 3 個濃度的病毒分別加入，各 0.1 毫升。而對照組加入培養液。 將 EJ 細胞采用同種方法加入 96 孔板。 采用培養液將 MMC、BCG 配置成 1 毫克/毫升， 將 NDV 配置成 10毫克/毫升。 待細胞貼壁 24 小時后將上清液吸出。 分別將 0.1 毫升的 MMC、BCG、NDV 加入各組。 將 0.1 毫升培養液加入對照組。5 天后采用電鏡觀察。
1.3 統計學分析
采用 POMS 軟件處理數據結果。
2 結果
2.1 體內實驗
對于膀胱癌細胞 ，BCG、MMC、NDV 均具有一定殺傷作用 ，而 NDV 注射至瘤對側以及瘤內能抑制其生長，且注射至瘤內的效果顯著好于瘤對側。
2.2 體外實驗
對于膀胱癌細胞，BCG、MMC、NDV 均具有顯著殺傷作用。
3 討論
自發現雞新城疫病毒具有抗瘤作用至今， 總結其作用機制如下：（1） 病毒蛋白可與完整細胞或者腫瘤細胞膜碎片有機結合，并將腫瘤抗原的免疫原性有效提高，從而促使宿主的體液以及細胞具有更強的免疫抗腫瘤能力。 （2）病毒可與腫瘤細胞產生直接或者特異性細胞病毒作用。 （3）能夠將宿主免疫系統中的各種細胞激活， 從而促使其產生 IL-6、IL-1、TNF-α 的能力增強[3]。而該病毒的免疫抗瘤作用， 即檢測各種免疫因子以及監測全身免疫系統的作用還需進行深入的研究[4]。
本文的研究中 ， 體內實驗表明 ： 對于膀胱癌細胞 ，BCG、MMC、NDV 均具有一定殺傷作用， 而 NDV 注射至瘤對側以及瘤內能抑制其生長，且注射至瘤內的效果顯著好于瘤對側。 體外實驗表明： 對于膀胱癌細胞，BCG、MMC、NDV 均具有顯著殺傷作用。 因此可以看出，NDV 對腫瘤體內具有主要的殺傷作用，而皮下注射引發的免疫抗瘤做用則是次要的。
綜上所述，雞新城疫病毒對膀胱癌細胞的體內、體外均具有良好的殺傷作用。